期刊導讀：向HBeAg陰性慢性HBV感染的轉化與cccDNA轉錄活性的降低相關

編者按：以往有研究證實HBeAg血清學轉換時HBVDNA顯著下降3-5log，常伴隨著cccDNA下降1-2log。然而為何HBeAg陰性慢乙肝伴隨著高病毒復制，而HBeAg陰性慢性HBV感染的HBVDNA滴度低或處于檢測不到的情況仍值得進一步探究。

最近JournalofHepatology上發表的最新研究確定了HBeAg陰性人群不同疾病階段病毒生命周期發生病毒抑制的機制，發現HBeAg陰性人群的cccDNA水平與NA治療的患者相似，而HBeAg陰性慢性HBV感染者（ENCI）cccDNA轉錄活性顯著低于HBeAg陰性慢乙肝（ENCHB）患者，這可能是ENCI患者病毒滴度低或低于檢測下限的主要原因。

研究方法

為了確定患者轉換為HBeAg陰性慢性HBV感染時病毒生命周期中哪些步驟發揮作用，該研究對68例處于不同疾病階段的慢乙肝人群活檢組織中的cccDNA、前基因組RNA（pgRNA）、總HBVRNA和HBVDNA復制中間產物（repDNA）進行了定量檢測。

患者基線

研究共包括13例HBeAg陽性人群（未細分為HBeAg陽性慢乙肝患者和HBeAg陽性慢性HBV感染者）、30例HBeAg陰性慢乙肝（ENCHB）、18例HBeAg陰性慢性HBV感染（ENCI）和7例接受NA治療的患者。大多數患者為HBV基因D型。

其中HBeAg陽性人群HBVDNA均處于高滴度。7例接受NA治療的患者中5例為HBeAg陰性，所有患者HBVDNA均低于檢測下限。ENCHB和ENCI是根據2017年EASL指南進行劃分，ENCHB的ALT水平持續或間歇性升高，HBVDNA>2000IU/mL，ENCI的ALT正常，HBVDNA≤2000IU/mL。

研究結果

1.NA的病毒抑制作用對cccDNA水平的影響有限

HBVDNA載量從HBeAg陽性人群的中位~1.7x108IU/mL降低至ENCHB的~2x105IU/mL（與HBeAg陽性相比低2.9log），再到ENCI的~1.5x102IU/mL（與HBeAg陽性相比低6log），NA治療組HBVDNA均低于檢測下限。

而HBeAg陽性人群的中位cccDNA為0.9拷貝/cell，ENCHB組為0.06拷貝/cell（與HBeAg陽性相比低1.2log），ENCI組為0.015拷貝/cell（與HBeAg陽性相比低1.8log），NA治療組cccDNA約為0.03拷貝/cell，與ENCI和ENCHB組的cccDNA水平相似，均高于檢測下限。該結果與以往研究相似，即NA的病毒抑制作用對cccDNA水平僅是有限的影響。

2.HBeAg陰性慢性HBV感染者cccDNA轉錄活性顯著更低

以pgRNA/cccDNA衡量cccDNA轉錄活性。其中HBeAg陽性組最高，中位值為286拷貝/cccDNA。HBeAg陰性人群的pgRNA活性整體較低，其中ENCHB組和NA治療組的cccDNA轉錄活性沒有顯著性差異（中位數分別為51和105拷貝/cccDNA）。與ENCHB相比，ENCI組的cccDNA轉錄活性（1.1拷貝/cccDNA）降低了46倍。

該分析顯示，與其他組相比，ENCI組的HBVRNA總量也顯著更少。且cccDNA轉錄活性與病毒基因型無關。

HBeAg陽性組中位repDNA/cell最高。ENCHB組中repDNA/cell降低了約2.6log；ENCI組中進一步降低了2log，與NA治療組repDNA/cell相似。

而該研究還測定了不同疾病階段的病毒復制效率，即repDNA/pgRNA值。與其他組相比，NA組的病毒復制效率最低（即低1.6-1.9log），但ENCI組的病毒復制效率未降低，這表明pgRNA下游的病毒復制未減弱不影響ENCI整體的病毒復制的低水平。

3.部分HBeAg陰性慢乙肝患者pgRNA下游病毒復制效率低

將ENCHB患者分為高復制效率組（ENCHB-HR）和低復制效率組（ENCHB-LR）。其中ENCHB-HR的復制效率與HBeAg陽性人群一樣高，而ENCHB-LR的復制效率與NA治療組相當，這表明在這類ENCHB患者中，pgRNA下游的復制受到非常強烈的抑制。

然而，這些患者的cccDNA轉錄活性與ENCHB-HR患者相比并沒有降低。

與ENCHB-HR患者相比，ENCHB-LR患者repDNA/cell和cccDNA/cell分別低224倍和8倍，并且與ENCI和NA治療組一樣低。ENCHB-LR患者的中位病毒載量比ENCHB-HR患者低約27倍。

這些結果揭示了ENCHB患者中存在抑制pgRNA下游HBVDNA復制的一個或多個步驟，并且提示ENCHB狀態實際上結合了兩個不同的階段，這兩個階段在控制病毒復制的潛在分子機制方面是不同的。

肝霖君有話說

HBeAg陰性慢性HBV感染者（ENCI）（中國指南稱為非活動性HBsAg攜帶者）病毒載量低或檢測不到，本研究發現主要是cccDNA轉錄活性降低導致，雖然pgRNA下游的病毒復制未減弱，但并未影響整體病毒的控制。

對乙肝自然史以及抗病毒治療中病毒生命周期的各個環節了解的越清晰，越有利于對于乙肝治愈優化策略和新藥研發的探索。

參考文獻：

SuslovA,MeierMA,KettererS,etal.TransitiontoHBeAg-negativechronichepatitisBvirusinfectionisassociatedwithreducedcccDNAtranscriptionalactivity[J].JHepatol,2020.